PCR實驗代測，RT-PCR實驗代測，實時熒光定量PCR實驗代測，十月*特惠，咨詢。

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實時熒光定量PCR（RealTime PCR）技術服務

實時熒光定量PCR 技術即是在PCR 反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號實時監測

整個PCR 進程，zui后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR 避免

了傳統PCR 以終產物檢測定量產生的偏差，提高實驗的重復性。該技術已被廣泛用于檢測細

胞mRNA 表達量的變化；比較不同組織的 mRNA 表達差異；驗證基因芯片，siRNA 干擾的實驗

結果等。

SYBR Green 熒光染料法

SYBR Green 是一種DNA 結合染料，能非特異地摻入到雙鏈DNA 中去。在游離狀態下，它不發出熒光，

但一旦結合到雙鏈DNA 中以后，便可以發出熒光。它的zui大優點就是可以與任意引物、模板相配合，用

于任意反應體系中。從經濟角度考慮，它也比其它的探針的價格要便宜得多。但由于它能與所有的雙鏈DNA

結合，所以一旦反應體系中出現非特異擴增，那它就會影響到定量結果的可靠性與重復性。要避免這種不

利因素，可以通過選擇良好的引物并優化反應條件以消除非特異性影響。

TaqMan 熒光探針法

PCR 擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標記

一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時，報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收；PCR 擴

增時，Taq 酶的5-3外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監測系

統可接收到熒光信號，即每擴增一條DNA 鏈，就有一個熒光分子形成，實現了熒光信號的累積與PCR 產

物形成*同步。

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實驗代測